利血平片—利血平的測(cè)定—熒光分析法

本方法采用熒光分析法測(cè)定利血平片中利血平的含量。

本方法適用于利血平片。

供試品加三氯甲烷溶解，乙醇稀釋制成供試液，經(jīng)前處理照熒光分析法，在激發(fā)光波長(zhǎng)400nm、發(fā)射光波長(zhǎng)500nm處測(cè)定熒光強(qiáng)度，計(jì)算出其含量。

1. 三氯甲烷

2. 乙醇

3. 五氧化二釩試液

熒光光度計(jì)

1. 五氧化二釩試液

取五氧化二釩適量，加磷酸激烈振搖2小時(shí)后得其飽和溶液，用垂熔玻璃漏斗濾過(guò)，取濾液1份加水3份，混勻，即得。

2.對(duì)照品溶液的制備

精密稱取利血平對(duì)照品10mg，置100mL棕色量瓶中，加三氯甲烷10mL溶解后，再用乙醇稀釋至刻度，搖勻，精密量取2mL，置100mL棕色量瓶中，用乙醇稀釋至刻度，搖勻，即得對(duì)照品溶液。

3. 供試品溶液的制備

取供試品20片，如為糖衣片應(yīng)除去包衣，精密稱定，研細(xì)，精密稱取適量（約相當(dāng)于利血平0.5mg)，置100mL棕色量瓶中，加熱水10mL，搖勻后，加三氯甲烷10mL，振搖，用乙醇定量稀釋至刻度，搖勻，濾過(guò)，精密量取續(xù)濾液，用乙醇定量稀釋成每1mL中約含利血平2µg的溶液，即得供試品溶液。

注：“精密稱取”系指稱取重量應(yīng)準(zhǔn)確至稱取重量的千分之一�！熬�密量取”系指量取體積的準(zhǔn)確度應(yīng)符合國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)中對(duì)該體積移液管的精度要求。

精密量取對(duì)照品溶液與供試品溶液各5mL，分別置具塞試管中，加五氧化二釩試液2.0mL，激烈振搖后，在30℃放置1小時(shí)，照熒光分析法，在激發(fā)光波長(zhǎng)400nm、發(fā)射光波長(zhǎng)500nm處測(cè)定熒光強(qiáng)度，計(jì)算，即得。

注：熒光分析法應(yīng)以配制供試品的同批溶劑為對(duì)照，采用1cm的石英吸收池。以吸收度最大的波長(zhǎng)作為測(cè)定波長(zhǎng)，一般供試品的吸收度讀數(shù)，以在0.3-0.7之間的誤差較小。儀器的狹縫波帶寬度應(yīng)小于供試品吸收帶的半寬度，否則測(cè)得的吸收度偏低。狹縫寬度的選擇，應(yīng)以減少狹縫寬度時(shí)供試品的吸收度不再增加為準(zhǔn)。由于吸收池和溶劑本身可能有空白吸收，因此測(cè)定供試品的吸收度后應(yīng)減去空白讀數(shù)，再計(jì)算含量。

中華人民共和國(guó)藥典，國(guó)家藥典委員會(huì)編，化學(xué)工業(yè)出版社，2005年版，一部，p.264。